El "moteado" del limón tucumano no tiene prohibiciones

Técnicos de la EEAOC descubrieron en los frutos investigados que se trata de puntuaciones provocadas por un hongo sin restricciones cuarentenarias para exportar a la UE y a EE.UU.

02 Abril 2004
En el limón tucumano suele observarse una sintomatología conocida como "moteado". Esta consiste en puntuaciones de color negro a castaño oscuro en la cáscara. Son lesiones circulares, con diámetro menor a 2 mm, que pueden estar a nivel o bien ser levemente deprimidas.
Desde que se detectó este síntoma en Tucumán se lo asoció con el hongo Guignardia citricarpa, agente causal de la mancha negra de los cítricos. Esta asociación tuvo los siguientes fundamentos:
Las características del síntoma de "moteado" son similares a las descriptas en la bibliografía internacional, como "falsa melanosis", nombre con el cual se conoce a uno de los cuatro síntomas que causa este patógeno cuarentenario.
Al realizar siembras de trozos de cáscara con síntomas en medios nutritivos (técnica de diagnóstico convencional) se aislaron cepas de Guignardia con características morfológicas y culturales similares a las de Guignardia citricarpa.
Hasta 2002 se conocía la existencia de dos especies de Guignardia presentes en los cítricos, una de ellas causante de la enfermedad mancha negra y la otra no patogénica (Guignardia sp.). Respecto de esta última especie se conocía que estaba presente en los cítricos sin causar ningún daño y también en otras especies vegetales en forma asintomática, o bien provocando lesiones en forma de motas muy pequeñas.
La diferenciación de estas dos especies de Guignardia mediante técnicas convencionales resultaba confusa debido a las características morfológicas y culturales similares de ambos hongos. En 2002, un grupo de investigadores de Holanda, Sudáfrica, EE.UU. y Brasil (Baayen y otros, Phytopathology vol. 92: 464-477, 2002) lograron diferenciar estas dos especies mediante estudios de ácidos nucleicos (ADN) del hongo (técnicas moleculares). Este grupo de investigadores determinó que Guignardia sp. provocaba puntuaciones menores a 2 mm de diámetro en frutos cítricos y concluyeron, luego de minuciosos estudios moleculares, que se trataba de Guignardia mangiferae.
Si bien morfológica y culturalmente es similar a Guignardia citricarpa, se trata de una especie diferente. Guignardia mangiferae está presente en cítricos y en numerosas plantas no cítricas cultivadas y silvestres de la Unión Europea y de EEUU. La distribución geográfica de este hongo es mucho más amplia que la especie patogénica (Guignardia citricarpa), incluyendo importantes áreas citrícolas tales como Florida, España, Sicilia e Israel.
En 2003, investigadores de Holanda y de EE.UU (integrantes del grupo de investigadores citados anteriormente) lograron desarrollar y validar un método rápido que permite diferenciar las dos especies. Este método está basado en estudios de ADN mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (Polymerase Chain Reaction - PCR). Se trata de un método de alta eficacia que utiliza cebadores que reconocen regiones específicas de cada una de estas dos especies.

Restricciones cuarentenarias
La Ue y los EE.UU. consideran a Guignardia citricarpa un riesgo sanitario para su citricultura, por lo tanto el ingreso de fruta desde áreas con presencia de este patógeno afectando los cítricos es sometido a legislaciones fitosanitarias. Estas restricciones cuarentenarias no se aplican a Guignardia mangiferae, puesto que este hongo está presente en los mencionados países.
Estudios realizados por la sección Fitopatología de la EEAOC, a cargo del doctor Daniel Ploper, cuenta con una colección de aislamientos de Guignardia obtenidos de diferentes síntomas similares a la mancha negra de los cítricos, así como de tejido sano de frutos y de hojas cítricas de Tucumán y la región NOA. También se cuenta con aislamientos obtenidos de otras plantas no cítricas. A partir de octubre de 2003, la sección Fitopatología de la EEAOC comenzó a ajustar esta técnica molecular desarrollada y publicada por el grupo de investigadores holandeses y americanos. Esta técnica está incluida como uno de los métodos de identificación de Guignardia citricarpa, dentro de los protocolos de diagnóstico que tiene la EPPO (European Plant Protection Organization) para plagas reguladas. En una primera etapa se comenzó a extraer ADN de los aislamientos de Guignardia obtenidos a partir de trozos de cáscara de limones de Tucumán con síntomas de "moteado". Esta etapa se realizó con la colaboración de la doctora María Eugenia Farías, del PROIMI. En la segunda etapa se ajustó la técnica molecular de diferenciación de especies con la colaboración de investigadores de la sección Biotecnología de la EEAOC, a cargo del doctor Atilio Castagnaro. Los resultados obtenidos mostraron que los aislamientos de Guignardia obtenidos de los síntomas de "moteado" corresponden a la especie Guignardia mangiferae, hongo sin restricciones cuarentenarias dada su naturaleza cosmopolita. Asimismo, los aislamientos obtenidos de frutos sin síntomas fueron también identificados como Guignardia mangiferae.

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